Evaluación inmunológica del tratamiento con benznidazol en la enfermedad de Chagas crónica / Immunological Assessment of Benznidazol Therapy in Chronic Chagas Disease

Para determinar el efecto del tratamiento con benznidazol sobre las células T de memoria específica para Trypanosoma cruzi, se seleccionaron 47 pacientes con tres reacciones serológicas positivas para T. cruzi, sin cardiopatía y edades comprendidas entre los 30 y los 50 años. El tratamiento se realizó con benznidazol en dosis de 5 mg/kg/d por 30 días. Se efectuó una evaluación serológica, inmunológica y clínica pretratamiento (tiempo 0) y a los 2, 6 y 12 meses postratamiento. Posteriormente, los controles se hicieron anualmente. La respuesta de linfocitos T frente a un lisado de amastigotas de T. cruzi se evaluó por la técnica de ELISPOT para IFN-ã. La frecuencia de linfocitos T de memoria productores de IFN-ã específicos para T. cruzi disminuyó significativamente en el grupo tratado (n = 33) versus el no tratado (n = 14) 12 meses después del seguimiento. Once de 25 (44%) pacientes que recibieron benznidazol negativizaron la respuesta para IFN-ã. Cuatro de los 11 (36%) pacientes con ELISPOT (+) que negativizaron la respuesta por ELISPOT para IFN-ã también negativizaron la serología convencional a los 2 años postratamiento. Durante el seguimiento no se observaron alteraciones clínicas. Estos hallazgos muestran que el benznidazol es capaz de modular la respuesta celular T de memoria específica para T. cruzi. La medición de la frecuencia de linfocitos T de memoria productores de IFN-ã podría constituir un ensayo más sensible y precoz para determinar el impacto/eficacia del tratamiento específico contra este parásito.

To determine the effect of benznidazol therapy on memory T cells specific for Trypanosoma cruzi, 47 patients between 30 and 50 years old and three positive serological tests for T. cruzi without cardiopathy were selected. Benznidazol was administered in a dose of 5 mg/kg/d during 30 days. Serological, immunological and clinical assessment was performed at basal (time 0) and at 2, 6 and 12 months following treatment, and once a year thereafter. IFN-ã ELISPOT assay was used to evaluate T cell responses against a T. cruzi lysate obtained from amastigotes. The frequency of IFN-ã - producing memory T lymphocytes specific for T. cruzi was significantly lower in the treatment group (n=33) compared to the control group (n=14) 12 months after the therapy. IFN- ã response became negative in 11 patients in the treatment group (44%). Among these 11 patients, conventional serology also became negative in 4 patients (36%) after 2 years of treatment. No clinical manifestations occurred during follow-up. These findings show that benznidazol is capable of modulating T cell responses specific for T. cruzi. Measuring the frequency of memory T lymphocytes producing IFN-ã might become a more sensitive test to determine earlier the impact and/or efficacy of the specific treatment against this parasite.

Respuesta de las celulas musculares cardiacas a la infeccion con Trypanosoma cruzi / Myocardial cell response to Trypanosoma cruzi infection

El objetivo de este estudio es determinar la capacidad de respuesta de la célula muscular cardíaca a la infección por Trypanosoma cruzi. Se investigó el rol de la multiplicación de las células musculares en la remodelación cardíaca, y su capacidad de producción de óxido nítrico y control del parasitismo intracelular. Para ello, se determinó la presencia del antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA) en los miocitos cardíacos re rata Wistar infectadas experimentalmente con T. cruzi, determinándose un aumento significativo del número de núcleos PCNA+ en los animales infectados agudos y crónicos. La capacidad de control del parasitismo intracelular y de producción de óxido nítrico fueron evaluados en cultivos primarios de miocitos cardíacos de ratas neonatas, estimulados con citoquinas in vitro. El análisis del parasitismo mostró que el número de miocitos cardíacos con amastigotes intracelulares fue menor en los cultivos estimulados con IL-1b, TNF-a e IFN-g. La producción de óxido nítrico fue mayor en los sobrenadantes de los cultivos celulares estimulados con citoquinas, tanto en los infectados como en los controles. Estos datos demuestran que la célula muscular cardíaca participa activamente en la respuesta del organismo durante la infección con T. cruzi.

Estudios sobre la infección de ratones endogámicos con clones de Trypanosoma cruzi / Infection of inbred mice with Trypanosoma cruzi clones

El proyecto de investigación consistió en infectar cepas de ratones endogámicos con clones de Trypanosoma cruzi derivados del aislamiento de parásitos individuales y estudiar el curso de la infección. El proyecto aún no se ha terminado. Las etapas de la investigación consistieron en la determinación de: 1) el espectro de virulencia de los clones de T. cruzi; 2) la susceptibilidad relacionada con la cepa de los ratones a la infección del número de parásitos inoculados sobre el resultado de la infección con clones de T. cruzi; 4) la influencia de la vía de inoculación sobre el resultadso de la infección; 5) la influencia de la manipulación del parásito sobre el resultado de la infección; 6) la influencia de la infección por clon de T. cruzi sobre el resultado de la infección causada por un segundo clon, y 7) análisis cronológicos multiparamétrico del curso de la infección en un grupo grande de ratones, para el desarrollo de un modelo para la enfermedad de Chagas crónica